中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准

水稻抗稻瘟病鉴定技术规范 NY /T

Standard for resistance identification

to rice blast disease

1 范围

本标准规定了水稻抗稻瘟病室内及田间、人工接种鉴定技术规范。

本标准适用于水稻抗稻瘟病抗性鉴定过程中水稻品种和材料的栽培、接种体准备、接种技术以及病情调查标准。

本标准中接种体适用范围为 ZA 、 ZB 、 ZC 、 ZD 、 ZE 、 ZF 、 ZG 群小种。

2 引用标准

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改条款（不包括勘误的内容）或修改版均不适用于本标准，然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本均适用于本标准。

GB/T 15970 稻瘟病测报调查规范

GB6959 植物保护机械名词术语

3 定义

本标准采用下列定义。

3.1 人工接种鉴定 artificial inoculation for identification

用人工繁殖或收集的病原物，仿照自然情况，创造发病条件，按一定量接种，根据接种对象抗性表现和发病程度确定品种抗性强弱。

3.2 接种体 inoculum

标准中特指用于人工接种鉴定用的稻瘟病菌( Pyricularia oryza )分生孢子悬浮液，其浓度约为 2×10 5 孢子/ml。

3.3 喷雾接种 spray inoculation

特指苗期鉴定时，用弥雾（雾滴的体积中值直径 50 μ m~100μm） 喷雾器将接种体喷洒于稻苗上，喷雾量为每 100 株苗 30ml 接种体。

3.4 注射接种 injection inoculation

将接种体 注射入水稻孕穗至半抽穗的苞内，每穗注射量 1ml。

3.5 苗期鉴定 seedling identification

参鉴品种生长至 3 ~ 4叶期 时，用稻瘟病接种体进行喷雾接种，控制温湿度以利于发病。

3.6 成株期鉴定 adult identification

标准中特指水稻穗颈瘟的抗性鉴定，于 水稻孕穗至半抽穗期接种，黄熟初期调查。

3.7 对照品种 control variety

为检验试验的可靠性，在品种鉴定时附加的抗病（ Tetep ）和感病（丽江新团黑谷）品种。

4 苗期鉴定

4.1 育苗方法

参鉴品种经浸种、催芽；选取发芽良好的种子单粒条播于盛有肥沃土壤的育苗盆内，苗间距为5cm左右，每品种播10株；每盆中分别设抗感对照各1份，2叶期定苗酌施氮肥，促苗以利于发病。

4.2 重复

按4.1育苗方法重复3次; 品种采用随机排列。

4.3 接种体准备

根据试验要求选用所需生理小种的菌株，将菌株用酵母培养基纯化培养 7d（恒温26℃），用打孔器切取直径为2mm的菌丝块，将若干菌丝块移至产孢培养基（培养基配方：米糠20g，酵母2.5g，琼脂20g， 蒸馏水1000ml）上，26℃恒温下培养8 ~ 10d，光照时间12h（早7：00至晚19：00,日光灯辅助照射）。

在光学显微镜下观察稻瘟病菌产孢情况，用血球计数板将孢子悬浮液浓度调节至约 2×10 5 孢子/ml，作为苗期喷雾的接种体。

4.4 接种时间

3 ~ 4叶期。

4.5 接种方法

在接种体中加入0.5 ~ 0.8%的Tween20进行喷雾接种，每100株苗约喷30ml；于26℃ ~ 28℃下；黑暗保湿(RH=95%)24h，然后将育苗盘移至25℃ ~ 30℃、RH>95%的高湿环境下培育。

4.6 调查部位

水稻叶片。

4.7 调查时间

接种后 7 ~ 10d进行调查；感病品种的发病程度不小于感（Ｓ2）级方可认为试验有效。

4.8 病情调查、记载

以发病最重的稻株作为该品种的抗性级别。以病斑是否典型，大小及数量记载病情，详见调查标准。

4.9 调查标准

苗期调查分级标准

级别 发病情况

高抗（ HR） 无病

抗（ R） 只有针尖大小的褐点或稍大的褐点

中抗（ MR） 圆形稍长的灰色小病斑,边缘褐色，直径约1-2mm

中感 1（MS1） 典型纺锤形病斑，长1-2cm，通常局限于两条主脉间，为害面积2%以下

中感 2（MS2） 典型病斑，为害面积2.1-10%

感 1（S1） 典型病斑，为害面积10.1-25%

感 2（S2） 典型病斑，为害面积25.1-50%

高感 1（HS1） 典型病斑，为害面积50.1-75%

高感 2（HS2） 叶片全部枯死

5成株期鉴定

5.1 鉴定圃管理

5.1.1 鉴定圃选择

鉴定圃选择在排灌方便，肥力水平中等的田块。

5.1.2 育苗

参鉴品种经常规浸种催芽后，按品种类型在不同时期播种于上述鉴定圃内；播种15d后施尿素1次，用量为75kg/hm 2 。

5.1.3 移栽规格

30 ~ 35d秧龄进行移栽，每品种移栽2行，每行7丛，每品种共14丛；株行距均为20cm；每10个品种间参插抗感品种各1份。

5.1.4 保护行

在参鉴品种四周插种保护行，株行距与参鉴品种相同；保护行品种采用感病品种原丰早或农虎 6号。

5.1.5 移栽至接种期间田间肥水管理

自参鉴品种移栽至接种期间，田间灌溉水管理与常规生产一致；移栽后 20d和接种前一周各施尿素1次，用量为75kg/hm 2 。

5.1.6 病圃施药

参鉴水稻品种在全生育期内避免使用杀菌剂，杀虫剂的使用根据病圃内害虫发生种类和程度而定，接种前后应避免施用任何药剂。

5.2 接种

5.2.1 接种方法

宜在阴天或傍晚，将上述接种体注射入苞内。

5.2.2 接种时间

孕穗 ~ 半抽穗期。

5.2.3 接种量

每穗注射 1ml接种体。

5.2.4 接种穗数

在每品种 14丛苗中，接种穗数不少于50穗，对接种稻穗作好标记。

5.3 调查时间

黄熟初期，其中感病品种的发病程度达到感级（ S）以上方可认为试验有效。

5.4 调查部位

穗颈。

5.5 调查量

在 14丛苗中，观测接种的穗颈发病情况。

5.6 病情记载

以穗颈瘟发病百分率记载病情。

5.7 分级标准

穗颈瘟调查分级标准

级别 发病情况

高抗（ HR） 无病

抗（ R） 发病率低于1.0%

中抗（ MR） 发病率1.0-5.0%

中感（ MS） 发病率5.1-25.0%

感（ S） 发病率25.1-50.0%

高感（ HS） 发病率50.1-100.0%

6对生理小种的抗谱测定

6.1 育苗

参鉴品种经浸种、催芽；℃选取发芽良好的种子单粒条播于盛有肥沃土壤的育苗盆内，苗间距为5cm左右，每品种播10株；每盆中加播鉴别品种一套，即Tetep、珍龙13、四丰43、东农363、关东51、合江18和丽江新团黑谷各1份，2叶期定苗酌施氮肥，促苗以利于发病。

6.2 重复

按6.1育苗方法同时重复3次；各品种采用随机排列。

6.3 接种体准备

同4.3

6.4 接种时间

3 ~ 4叶期。

6.5 接种方法

同4.5，但每个小种相互隔离接种，以免相互影响。

6.6 调查部位

水稻叶片。

6.7 调查时间

接种后 7 ~ 10d进行调查；以感病对照品种丽江新团黑谷的发病程度达到感（S2）或高感（HS1）级方可认为试验有效。

6.8 调查量

同4.8。

6.9 病情记载

同 4.9。

7 接种后与鉴定后材料的处理

7.1 接种体：将接种后剩余的接种体集中到一容器中作灭菌处理。

7.2 鉴定后稻株处理：将稻株焚烧。